新生贵族:Roche-Kapa

来源: 生物360 / 作者: 2018-10-06
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KAPA Biosystems 是一家美国知名生物公司,成立于 2006 年,其生产基地位于南非开普敦。KAPA Biosystems 致力于研发、生产下一代 PCR(Next-Generation PCR)所需的生物酶。目前其分子进化平台开发的产品已被广泛应用于 DNA 扩增、二代测序、分子诊断等领域。

KAPA Biosystems 技术团队在蛋白质工程、基因组学、蛋白质组学、合成生物学方面获得非常突出的成绩。

KAPA Biosystems 公司追求科学研究与市场化运作的完美结合,执着于“科技创造完美产品,助力生命科学研究”这一最高宗旨。Kapa 公司目前主要是在“直接进化(directed evolution technology platform)"的专利技术平台上来筛选和生产高品质的生物酶。目前生物医药领域所使用的大部分生物酶都只是天然存在形式,即使有些酶经过基因工程改造,但是由于酶分子自身的结构和功能限制,要想得到真正满足科研工作人员需要的产品,却是一件费时费力的事情,而且常常达不到预期的要求。“直接进化" 技术正是针对这一现实情况,运用遗传,基因工程,生物信息学等技术来在分子水平上设计真正满足不同实际要求的生物酶。通过创新,Kapa 为广大的科研人员提供了一系列拥有多项专利技术的产品,不仅能够满足普通科研需要,同时为高通量,基因芯片等高新技术的普及创造了条件。 运用“直接进化 "技术,Kapa 目前已经开发出来了以下的高品质产品:

1. Kapa2G 超强 PCR (Kapa2G Robust PCR)。适用范围:可用于普通的 PCR 反应中;AT 和 GC 碱基含量高的扩增;模板 中含有常见的 PCR 反应抑制物,例如,盐离子,尿素,SDS, 乙醇,EDTA 等;石蜡油包被样品;粪便样品;菌落 PCR。

2. Kapa2G 快速 PCR(Kapa2G Fast PCR)。高灵敏度,高特异性。延伸速度高达 1 秒 /kb,(常规延伸速度是 60s/kb),可扩增出长达 5kb 的目的片段,节省大约 75% 的反应时间。

3. 实时荧光定量 PCR (Kapa SYBR qPCR)。和其他公司的类似产品相比,Kapa SYBR qPCR 改造了 Taq DNA 多聚酶,而不是对荧光染料进行化学改造,因此大大提高了信号强度以及反应的有效性。更重要的是,Kapa 的系列产品可以适用于市场上现有的 Real-time PCR 仪器。

4.Kapa 长片段 DNA 多聚酶 (Kapa LongRange)。Kapa 长片段 DNA 多聚酶是由 Taq DNA 聚合酶和修饰过的 archael(B 型)高保真 DNA 聚合酶组成的双酶系统。后者含有校正功能。这种双酶系统是专门为长片段和敏感 PCR 扩增而设计的。一般而言,普通的 Taq 酶由于缺少校正功能,因此随着错误碱基的不断产生,使得扩增过早的终止,从而大大降低了扩增效率。这也是导致在扩增长片段或者模板浓度很低时,使用普通 Taq 酶常常失败的原因。另一方面,虽然具有校正能力的多聚酶拥有很高的正确率,但由于其 3 到 5 的外切酶活性,引物会被降解掉,从而也影响到扩增的灵敏度。Kapa 长片段产品的原理是:在 Taq DNA 多聚酶中加入具有校正能力并且修饰过的多聚酶,可以使得不匹配的碱基被修正;同时,和只有校正功能的多聚酶相比,kapa 的双酶系统中具有校正功能的酶所占的比例较少,因此可以相对延长扩增的循环数和时间,从而提高产量,同时得到高保真的 PCR 产物。虽然两种酶都有 5 到 3 的 DNA 聚合功能,但是只有 Taq 酶具有依赖于双链的 5 到 3 的聚合酶活性, 而只有 B 型 DNA 聚合酶具有 3 到 5 的外切酶功能(也就是校正功能)。

5.Kapa 高保真 DNA 多聚酶 (Kapa Fidelity)。是经过修饰的,耐热的高保真 DNA 多聚酶。既有 5 到 3 的多聚酶活性,又有 3 到 5 外切校正功能,因此能够扩增出优质的高保真片段。高保真:Kapa 高保真 DNA 多聚酶的扩增出正确片段的几率是普通 Taq 酶的 15 倍,KOD/Pfx2 倍;应用广泛:可以扩增出长至 6kb 的质粒或者 lambda DNA, 或者长至 2kb 的基因组 DNA 扩增;用量少:由于其高活性,和其它的高保真产品相比,每个反应的用量要少,从而为实验者节省资金;易于克隆:Kapa 高保真 DNA 多聚酶扩增出钝头产物,非常易于克隆;快速:扩增速度是 pfu 的 2 - 3 倍。 另外,还有普通的 KapaTaq DNA 多聚酶,以及热启动酶,T4 连接酶,快速连接试剂盒等产品。

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即日起至 6 月 31 日,登陆“ 爱 TA 就送 TA KAPA”活动主页,为你自己或者你所关爱的任何一人送出“KAPA 关爱祝福”,申请试用装,秀出你们的试用成果或心得,就有机会获得 KAPA 二代测序文库制备产品试用装。

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