一种检测外泌体 miRNA 的分子探针方法

外泌体之家 / 2016-07-14
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外泌体是一种包含来自亲代细胞 miRNA 生物标志物的细胞外小囊泡。因为这些小囊泡在体液内广泛存在,所以在很多情况下外泌体标志物在诊断上有着巨大的优势。在一般情况下,基于 PCR 的方法可以用于外泌体 miRNA 检测,但这个方法费力、昂贵、费时,使得它们不适合于疾病的高通量的诊断。最近,韩国仁川国立大学的研究人员报告说,外泌体单一的 miRNA 可以特异性地被寡核苷酸探针或分子探针来检测。在这项研究中,研究人员首次发现外泌体中多个 miRNA 能够同时利用靶向 miRNA 的分子探针进行检测。乳腺癌细胞系 MCF- 7 的外泌体被用于这项研究中,这是因为 MCF- 7 中的一些目的 miRNA,例如 miR-21、miR-375 和 miR-27A 表达水平较高。在癌症细胞来源的外泌体里,分子信标可以与多种 miRNA 成功结合,即使在人体血清浓度很高的情况下。此外,值得注意的是,因为体积太小,外泌体里的多种生物标记物荧光团的选择很重要。该研究中介绍的方法在疾病诊断、预后以及对治疗的反应的高通量分析中很有优势,因为这是一种节约时间劳力成本的技术方法。

图:利用分子探针对外泌体中的 miRNA 的原位分子杂交。F:荧光染料。Q:淬灭剂。

参考文献:Lee JH, Kim JA, Jeong S, Rhee WJ. (2016)Simultaneous and multiplexed detection of exosome microRNAs using molecular beacons. Biosens Bioelectron 86:202-210.[IF=7.476]

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